Menu

Научный календарь Ноябрь 2020

Каким образом в измерительном канале WPC обнаруживаются опухолевые лимфоциты? 

Cell membranes of neКлеточные мембраны опухолевых лимфоцитов более зрелые и проницаемые, что дает более сильные флуоресцентные сигналы.oplastic lymphocytes are more mature and more readily permeated, causing higher fluorescence signals.

Клеточные мембраны слегка перфорированы, хотя клетки в значительной мере остаются неповрежденными. Внутриклеточные нуклеиновые кислоты (главным образом РНК) помечаются флуоресцентными маркерами.

Сигналы бокового рассеяния света у опухолевых лимфоцитов слабее, чем у других лейкоцитов.

Congratulations!

That's the correct answer!

Sorry! That´s not completely correct!

Please try again

Sorry! That's not the correct answer!

Please try again

Notice

Please select at least one answer

Научное обоснование

Лимфома из клеток мантийной зоны (ЛКМЗ) — специфический тип лимфомы и наиболее распространенная причина рака крови [1]. Лимфомы характеризуются неконтролируемой пролиферацией лимфоцитов (подгруппа лейкоцитов) и составляют неоднородную группу заболеваний.

В человеческом организме существуют разные подгруппы лимфоцитов, в том числе Т- и В-лимфоциты. Лимфомы, вызываемые злокачественными В- и/или Т-лимфоцитами, подразделяют на ходжкинские лимфомы (ХЛ) и неходжкинские лимфомы (НХЛ). Лимфома из клеток мантийной зоны представляет собой редкую В-клеточную лимфому и, следовательно, принадлежит к группе НХЛ [1].

Название «лимфома из клеток мантийной зоны» обусловлено этиологией злокачественных клеток, происходящих из мантийной зоны лимфатического узла. Эти опухолевые В-лимфоциты разносятся по организму и образуют периферические опухоли. Это заболевание считается агрессивным и быстро прогрессирующим. Согласно классификации лимфом ВОЗ, существует еще один тип медленно развивающейся лимфомы из клеток мантийной зоны, однако он также неизлечим и может развиться в агрессивную форму [2].

Повышенное количество опухолевых лимфоцитов в крови пациента видно при клиническом анализе крови и, следовательно, становится поводом для проведения дополнительных процедур дифференциальной диагностики до тех пор, пока не подтвердится окончательный диагноз.  

Одна из величайших сложностей в цитологии —­ дифференциация лимфоцитов в мазках крови, в связи со множеством морфологических вариантов и заболеваний. Наряду с опытом исследователя, для квалифицированного цитологического анализа крови необходимо наличие стандартизированной номенклатуры, особенно в случаях, когда лимфоциты изменены. Лимфоциты необычной морфологии могут высвобождаться в периферическую кровь из-за реактивных заболеваний (например, вирусных инфекций) и новообразований (например, лимфом). Согласно классификации лимфоцитов 2011 г., эти лимфоциты описываются как «атипичные» независимо от причины. Здесь понятие «атипичные» означает, что при окрашивании по методу Пап­пенгейма эти лимфоциты отличаются от типичных лимфоцитов или больших зернистых лимфоцитов (БЗЛ) [3].

Examples of typical and atypical lymphocytes

Для дальнейшей классификации клеток и оценки прогноза необходимо определение иммунофенотипа, гистологическая диагностика и дополнительное цитогенетическое или молекулярно-генетическое исследование.

Благодаря инновационной системе реактивов анализаторы Sysmex серии XN позволяют дифференцировать клетки по их функциональности, преодолевая ограничения морфологического исследования и позволяя сделать выводы о

  • зрелости клетки,
  • злокачественности клетки, и
  • состоянии активации клетки [4].

Численные результаты

В лаборатории был исследован образец периферической крови 60-летнего мужчины без заболеваний в анамнезе. У матери пациента был диагноз ходжкинской лимфомы. Анализ показал выраженный лейкоцитоз в сочетании с анемией (гемоглобин = 73 г/л или 4,5 ммоль/л) и тяжелую тромбоцитопению (тромбоциты = 13 х 109/л). Повторное исследование нового образца крови, в том числе в канале PLT-F, подтвердило тяжелую тромбоцитопению с результатом PLT-F = 8 x 109/л. В таком случае всегда возникает вопрос, каково происхождение лимфоцитов — реактивное или опухолевое.

Интерпретация диаграммы рассеяния

При использовании профиля CBC+DIFF (клинический анализ крови + лейкоцитарная формула) на анализаторе XN лейкоциты подсчитываются в измерительном канале WNR и дифференцируются в измерительном канале WDF. На диаграмме рассеяния этого пациента, полученной в канале WDF, нельзя было четко разделить субпопуляции лейкоцитов, что привело к появлению флажка ‘Blasts/Abn Lympho?’ (бласты/аномальные лимфоциты?). И реактивные лимфоциты, и клетки лимфомы обладают повышенной флуоресценцией (см. серое скопление).

Дополнительный измерительный канал для идентификации предшественников лейкоцитов и патологических клеток — канал WPC, в котором используется специфический набор реактивов, влияющих на повышение проницаемости клеточной мембраны. Эта современная технология позволяет отделять предположительно злокачественные клетки от здоровых.

Высокая степень повреждения мембраны под действием лизирующего реагента WPC ведет к выходу клеточных компонентов сквозь поры и уменьшению размеров клетки. Кроме того, в клетку может проникнуть больше флуоресцентных маркеров и, следовательно, связаться даже с ядерной ДНК, что в свою очередь ведет к большей флуоресценции и интенсивности сигнала. Структура мембран опухолевых лимфоцитов более зрелая чем, например, у бластных клеток, и, следовательно, проницаемость выше, что способствует усилению флуоресцентных сигналов. В этом примере сработал флажок ‘Abn Lympho?’ (аномальные лимфоциты?), что вызывает подозрения на опухолевые лимфоциты.

Последующий анализ методом проточной цитометрии подтвердил крупную моноклональную популяцию В-лимфоцитов с фенотипом, соответствующим лимфоме из мантийных клеток (подробные результаты см. ниже).

Результаты иммунофенотипирования

Абсолютное число моноклональных В-лимфоцитов было 57,59 x 109/л с 91% лимфоцитов, 0,2% CD3+ T-лимфоцитов, 0,1% натуральных киллеров. Соотношение CD4/CD8 было 2,0.
91% аномальных CD19+ B-лимфоцитов с этим фенотипом: каппa++, CD19+, CD20++, CD5+, CD38zw+, FMC7+, CD79b+, CD43-, CD10-, CD200-, соотношение моноклональных K/L: >10, CD23 — возможно слабоположительная реакция (высокий фоновый сигнал).

Кроме того, биопсия костного мозга показала, что примерно 70% КМ составляли малые В-лимфоциты, относящиеся к неходжкинской лимфоме и иммуногистохимически наиболее сходные с лимфомой из клеток мантийной зоны.

Литература

[1] Fact sheet ‘Mantle Cell Lymphoma’ from lymphoma.org. Access date 03.09.2020.

[2] Swerdlow SH et al. (2016) The 2016 revision of the World Health Organization classification of lymphoid neoplasms. Blood127(20): 2375–2390. https://doi.org/10.1182/blood-2016-01-643569.

[3] SEED ‘Lymphocyte differentiation update – helpful or dispensable?

[4] Sysmex white paper ‘Going beyond the visible: Reliable characterisation of WBC functionality.’

Copyright © Sysmex Europe GmbH. All rights reserved.
Настройте параметры cookie-файлов

Мы используем куки (cookies, куки-файлы) для того, чтобы обеспечить Вам оптимальное использование нашего веб-сайта и улучшить нашу коммуникацию с Вами. Мы принимаем во внимание Ваш выбор и используем только те данные, на которые Вы выдали нам Ваше согласие.

* может привести к ограничениям в отношении содержания сайта и эффекта его использования
Подробнее о cookie-файлах
Необходимые куки
Эти куки помогают пользоваться нашим веб-сайтом за счет того, что они обеспечивают такие базовые функции как навигацию по сайту и доступ к безопасным разделам нашего сайта. Наш веб-сайт не может работать надлежащим образом без этих куки.
Куки для статистики
Эти куки помогают нам понять, как пользователи взаимодействуют с нашим веб-сайтом, за счет сбора информации на анонимной основе. Благодаря этой информации мы в состоянии непрерывно совершенствовать предлагаемые нами продукты и услуги.
Маркетинговые куки
Они используются для того, чтобы следовать за посетителями на веб-сайтах. Цель заключается в том, чтобы показывать рекламные объявления, которые относятся к кругу интересов и привлекают внимание отдельных пользователей, представляя за счет этого ценность для издателей и третьих сторон, занимающихся рекламной деятельностью.