Menu

Научный календарь Май 2019

Почему рекомендуется нормализация результатов скрининговых и подтверждающих исследований на ВК относительно местных пределов нормы?

Так как это повышает чувствительность анализа

Так как это повышает специфичность анализа

Так как это повышает точность результатов пациента

Congratulations!

That's the correct answer!

Sorry! That´s not completely correct!

Please try again

Sorry! That's not the correct answer!

Please try again

Notice

Please select at least one answer

Научное обоснование

Антифосфолипидный синдром (АФС) — распространенное аутоиммунное заболевание. Он может быть «первичным», если нет других заболеваний, или «вторичным», если связан с имеющимся нарушением. Клинически АФС сопровождается явлениями венозной и/или артериальной тромбоэмболии и осложнениями беременности, ведущими к многократным эпизодам внутриутробной смерти плода, задержке роста и преждевременным родам. В редких случаях может развиться катастрофический антифосфолипидный синдром (КАФС), характеризующийся тромбозом многих органов и высокой смертностью [1].
Клинический спектр АФС широк, и необходимо подобрать наиболее подходящее лечение. Диагноз АФС подтверждается при наличии хотя бы одного клинического и одного из лабораторных критериев. Положительный результат лабораторного анализа необходимо подтвердить повторным анализом не менее чем через 12 недель, чтобы убедиться, что он не ложноположительный [2].

Клинические критерии АФС кратко представлены в следующей таблице [1].

Тромбоз сосудов Один или несколько клинических эпизодов объективно подтвержденного тромбоза сосудов
Заболеваемость во время беременности 1.    Один или несколько эпизодов необъясненной гибели морфологически нормального плода на десятой неделе гестации или позже
2.    Одни или несколько преждевременных родов морфологически нормального новорожденного на 34 неделе гестации или раньше из-за (i) эклампсии или тяжелой преэклампсии, либо (ii) тяжелой недостаточности плаценты
3.    Три или более необъясненных спонтанных аборта подряд, произошедших до десятой недели беременности, при исключении анатомических и гормональных нарушений матери и хромосомных причин

Лабораторная диагностика включает два подхода и заключается главным образом в определении антител к фосфолипидам [3, 7, 8]:

1.    определении волчаночного ангикоагулянта (ВА) путем анализа свертывания
2.    определении антител к кардиолипину (аКЛ) и/или к β-2-гликопротеину 1 (аβ2ГП1) специфическими методами твердофазного иммунологического анализа

Первая линия методов лабораторной диагностики АФС предложена для измерения антикоагулянтной активности антител к фосфолипидам (аФЛ). В новых руководствах рекомендуется использовать два взаимодополняющих метода: тест с разведенным ядом гадюки Рассела (ТРЯГР) и АЧТВ для определения ВА. В обоих методах используется низкая концентрация фосфолипидов для скрининга (напр., HEMOCLOT™ LA-S или CEPHEN™) и высокая концентрация фосфолипидов для подтверждающего исследования (напр., HEMOCLOT™ LA-C или CEPHEN™ LS). Этот набор исследований можно провести, смешав плазму пациента (ПП) и нормальную объединенную плазму (НОП) в пропорции 1:1 [3, 4, 9, 10]. Текущая терапия антикоагулянтами может помешать определению ВА, так как принцип метода основан на конкуренции антител с факторами свертывания, зависимыми от витамина К, за участки связывания на анионных фосфолипидах. Таким образом, следует использовать реактивы с высокой чувствительностью к ВА, но менее подверженные мешающему действию антикоагулянтов (анти-АВК или оральных антикоагулянтов прямого действия) [5]. Результаты скрининговых и подтверждающих исследований рекомендуется нормализовать относительно местных пределов нормы (ПН); с этой целью исследуют не менее 40 образцов плазмы от здоровых людей, не применяющих лекарств и не имеющих заболеваний, так как результаты пациентов, полученные разными лабораториями, варьируют из-за различий в методах оценки свертывания и оборудовании [6]. Нормализованные отношения, вычисленные путем деления времени свертывания пациента на пределы нормы с целью снижения вариабельности между методами или внутри метода, необходимо определять для каждой серии образцов [5]. Поскольку такое количество доноров доступно не каждой лаборатории, приемлемая альтернатива — проверка пределов нормы, указанных производителем [6]. В целом, положительные по ВА образцы плазмы имеют нормализованное отношение скринингового/подтверждающего исследования >1,20, однако каждая лаборатория должна определить граничные значения (См. рис. 1).

Вторая линия методов — иммунологические методы определения антител (IgM и IgG) аКЛ и аβ2ГП1. Значение имеют два типа антител аКЛ: связывающиеся с кардиолипином непосредственно и связывающиеся с кардиолипином в присутствии белка-кофактора β2ГП1. Однако лишь последние специфичны для АФС; первые обнаруживаются у больных инфекционными заболеваниям, такими как малярия, гепатит или сифилис. Предыдущие методы определения антител к кардиолипину/фосфолипидам (АКЛ/АФЛ) определяли антитела к кардиолипину в присутствии бычьего β2ГП1, что могло привести к неправильным результатам. Сегодня эти типы методов часто заменяют методами с неокисленными анионными фосфолипидами и неденатурированным человеческим β2ГП1 (высокоочищенным), дающими возможность более специфического и стандартизированного определения. Специфические методы определения антител к β2ГП1, обнаруживающие аутоантитела к домену 1 специфического β2ГП1, могли бы повысить специфичность при контролируемой концентрации [5].

Другие методы, применяющиеся в связи с АФС, обнаруживают аутоантитела к протромбину, белку S, белку С, белку Z, аннексину V и фактору XIII. Однако из-за отсутствия стандартизации и доказательств клинической применимости для исследования пациентов с АФС включать эти методы в стандартные наборы исследований не рекомендуется.
В целом, умеренных или высоких концентраций антител достаточно для постановки диагноза АФС, тогда как пограничные результаты требуют дополнительного подтверждения через некоторое время. У пациентов с двумя или более положительными результатами определения ВА, АКЛ/АФЛ или антител к β2ГП1 отмечается большая частота тромботических явлений или выкидышей, чем у пациентов с положительным результатом только одного исследования. Таким образом, настоятельно рекомендуется выполнять все эти исследования одновременно на одном образце и повторить их как минимум через 12 недель.

АФЛ очень неоднородны, с перекрывающимися реакциями у некоторых пациентов, отсутствующими у других. Таким образом, для классификации антител, присутствующих у обследуемого пациента, необходимы точные методы с подтвержденными рабочими характеристиками. Хотя методы лучше стандартизированы, более специфичны и точны, в последующие годы можно ожидать дальнейшего совершенствования [5].

Литература

[1] Miyakis S, Lockshin MD, Atsumi T, et al. International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS). J Thromb Haemost. 2006 Feb; 4(2):295–306.

[2] Dlott JS. Diagnosing antiphospholipid antibody syndrome: a review of the criterion for definite APS. Urol Nephrol J 2015; 8(Suppl. 1):18–21.

[3] Devreese KMJ. Antiphospholipid antibody testing and standardization. Int Jnl Lab Hem. 2014; 36:352–363.

[4] Ledford-Kraemer MR, Moore GW, Bottenus R, Daniele C, de Groot PG, Exner T, et al. Laboratory testing for the lupus anticoagulant. 1st ed. Approved guideline. CLSI document H60. Wayne, PA, USA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2014.

[5] Amiral, Peyrafitte, Dunois, Vissace, Seghatchian, et al. Anti-phospholipid syndrome: Current opinion on mechanisms involved, laboratory characterization and diagnostic aspects. Transfusion and Apheresis Science 56 (2017) 612–625.

[6] Clinical and Laboratory Standards Institute. Defining, Establishing and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory. 3rd ed. Approved guideline. C28-A3. Wayne, PA, USA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.

[7] Sangle NA, Smock KJ. Antiphospholipid antibody syndrome. Arch Pathol LabMed 2011; 135:1092–6.

[8] Pengo V, Banzato A, Bison E, Denas G, Zoppellaro G, Bracco A, et al. Laboratory testing for antiphospholipid syndrome. Int J Lab Hematol 2016; 38(May (Suppl. 1)):27–31.

[9] Moore GW, Culhane AP, Daw CR, Noronha CP, Kumano O. Mixing test specific cut-off is more sensitive at detecting lupus anticoagulants than index of circulating anticoagulant. Thromb Res 2016; 139(March):98–101.

[10] Pengo V, Tripodi A, Reber G, Rand JH, Ortel TL, Galli M, de Groot PG. Update of the guidelines for lupus anticoagulant detection. J Thromb Haemost. 2009; 7:1737–40.

Copyright © Sysmex Europe GmbH. All rights reserved.
Настройте параметры cookie-файлов

Мы используем куки (cookies, куки-файлы) для того, чтобы обеспечить Вам оптимальное использование нашего веб-сайта и улучшить нашу коммуникацию с Вами. Мы принимаем во внимание Ваш выбор и используем только те данные, на которые Вы выдали нам Ваше согласие.

* может привести к ограничениям в отношении содержания сайта и эффекта его использования
Подробнее о cookie-файлах
Необходимые куки
Эти куки помогают пользоваться нашим веб-сайтом за счет того, что они обеспечивают такие базовые функции как навигацию по сайту и доступ к безопасным разделам нашего сайта. Наш веб-сайт не может работать надлежащим образом без этих куки.
Куки для статистики
Эти куки помогают нам понять, как пользователи взаимодействуют с нашим веб-сайтом, за счет сбора информации на анонимной основе. Благодаря этой информации мы в состоянии непрерывно совершенствовать предлагаемые нами продукты и услуги.
Маркетинговые куки
Они используются для того, чтобы следовать за посетителями на веб-сайтах. Цель заключается в том, чтобы показывать рекламные объявления, которые относятся к кругу интересов и привлекают внимание отдельных пользователей, представляя за счет этого ценность для издателей и третьих сторон, занимающихся рекламной деятельностью.